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聚合物基质的填充物一般用亲水性凝胶
所属分类：显微镜百科 点击次数：157 发布日期：2022-06-20
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聚合物基质的填充物一般用亲水性凝胶 色谱法在核酸纯化中的应用 通常在色谱分析前，需要进行裂解后的分离或富集。富集方法需要使用乙酸铵和聚乙二醇沉淀法来进一步去除宿主蛋白以及小分子核酸。与此同时，这些方法也在色谱提纯前减少了样本或处理液体的体积，而分离过程也同样需要离心和过滤以去除细胞碎片： 色谱法可相对容易地进行优化并按比例增大，而且许多质粒特征，如电荷数和大小可以通过特定的设计得以区分。 小颗粒留在了凝胶的孔穴里，而大分子则直接通过排阻色谱法适用于将小的环状DNA与大的质粒分离或者将无机盐及一些小分子从生物大分子中去除，同时也可去除荧光标记反应混合物中游离的荧光标记的核酸。排阻色谱法的主要缺点在于在分离限制酶断片时存在上限，单一的凝胶柱并不能提纯所有的核酸。 排阻色谱法中常用亲水层包裹的网状聚合基质或硅胶颗粒基质，硅胶颗粒的缺点在于会通过吸附造成溶质的保留，并可能会造成溶质分子的降解为降低吸附量，这些硅胶颗粒通常与有机衍生物反应进行修饰： 聚合物基质的填充物更常用，一般用亲水性凝胶，可使用水溶液对核酸进行洗脱。这些凝胶是相对惰性的，其交联程度决定了孔径的大小葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂是三种比较常见的交联聚合物。Amersham Biosciences出售的交联葡聚糖，商品名为Sephadex，其根据在水中膨胀时保水量进行分类；
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