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无质粒细胞菌落细胞培养实验电子显微镜
所属分类：显微镜百科 点击次数：213 发布日期：2022-06-20
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无质粒细胞菌落细胞培养实验电子显微镜 另一个筛选的方法是在载体上放置一个合成基本代谢物(例如氨基酸)的必需基因。如果导入载体的宿主是这种氨基酸的营养缺陷株，载体就可以和宿主发生互补o。在没有这种氨基酸的培养基中，只有含有质粒的细胞能够生长。因为合成缺陷因子的基因能够被整合到染色体上，或者因为亲本染色体的回复突变，通常使用双缺陷型菌株来减少无质粒细胞取得生长优势的概率。 这两种方法都有一个缺点，即使细胞丢失了质粒，无质粒细胞在分裂数次后仍然保留有足够的提供抗生素抗性或者生产营养缺陷因子的基因产品。这样，这些细胞将不能在选择性平板上形成活菌落(形成一个菌落需要繁殖约25代)，但是在大规模系统中它们仍然能够存活并分裂繁殖。这些无质粒细胞消耗资源，却不生产产品。 另一个相关的问题是，特别是在大规模系统中，含质粒细胞可能保护无质粒细胞免受选择性试剂的伤害。例如，含有质粒的营养缺陷型细胞可能会分泌足够的营养缺陷因子，以致无质粒细胞能够生长。对于抗生素，负责降解抗生素的酶可能被分泌到培养基中。
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