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筛选经人工设计修饰后的质粒实验电子显微镜
所属分类:显微镜百科 点击次数:154 发布日期:2022-06-20
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筛选经人工设计修饰后的质粒实验电子显微镜防止胞内蛋白裂解的另一种方法是开发利用分泌性载体,在分泌性载体中,一段信号序列和目标蛋白连接在一起。如果该蛋白质能在一种宿主中被分泌出来,那么至少在使用正确信号序列的情况下,它通常也能被其他的宿主分泌。将蛋白质的天然信号序列(例如,来自于真核生物的蛋白质)用宿主专一性的信号序列替代通常能够促进分泌。 分泌过程是很复杂的,将一段信号序列和正常的非分泌性蛋白(例如,胞质蛋白质)连接在一起并不能确保分泌,虽然已经报道了几个有关正常胞质蛋白质分泌的例子。显然,成熟形式的蛋白质含有分泌过程所必需的“信息”,但是没有通用的规则明确规定,当一段信号序列和正常的非分泌性蛋白(例如胞质蛋白质)连接在一起时将导致分泌发生。 为了确保构建过程的遗传稳定性,以及为了对理想的载体一宿主组合的选择有所帮助,载体应该被设计成可以在选择性生长条件下使宿主存活。最常用的策略是在载体中插入一个编码抗生素抗性的基因。常用的克隆质粒pBR322含有氨苄西林和四环素的抗性基因。在筛选经人工设计修饰后的质粒时,多抗性基因是很有帮助的。
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