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激光共焦荧光显微镜测试-荧光技术的应用
所属分类：显微镜百科 点击次数：185 发布日期：2022-06-20
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激光共焦荧光显微镜测试-荧光技术的应用荧光漂白 光漂白(也称为褪色)是在光照条件下使其发生化学反应或结构改变，从而失去发荧光的特性，就是所谓的漂白。它常用于生物体内扩散速率常数的测定。由单重激发态跃迁到三重激发态，荧光团会和另外的分子反应产生不可逆的共价修正。简而言之，荧光漂白是荧光团的光化学破坏。在荧光漂白之前，某一特定荧光团的激发和辐射周期的平均数值取决于分子结构及所处环境。一些荧光团漂白很快，只需释放一些光子，然而对于其他的，在漂白之前需要经历成千上万次周期。 每一个荧光团都有不同的光漂白特性。对于激光共焦荧光显微镜来讲，光漂白是更大的问题，因此实际测试中需要考虑避免或减轻光漂白程度。因此在激光共焦荧光显微镜测试中，需要选取合适的染料，该染料可以在正常激光强度照射下更大程度减轻光漂白程度。当具有光漂白的染料用于测试中，以下三种方法可以降低光漂白程度：尽可能用低的激光强度；尽可能降低照射的时间(实际测试中，尽快完成一次测试)；采用自由基清除体。 多数的光漂白可以归结于自由基。采用自由基清除体则能降低光漂白的速率。常用自由基清除体包括五倍子酸丙烷、对苯二胺以及三乙烯二胺(DABCO)。
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