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用于酵母孢子和细菌细胞等小型细胞的显微镜型号
所属分类:显微镜百科 点击次数:104 发布日期:2022-06-20
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用于酵母孢子和细菌细胞等小型细胞的显微镜型号 人们常用显微操作器来分离包括酵母在内的微生物的单细胞和单孢子.对于酵母孢子和细菌细胞等小型细胞,可以用与子囊解剖相同的解剖针来分离.但是,对于酵母的二倍体或多倍体等大型细胞,即便用解剖针触着细胞并使之移动,也很难使之附着在解剖针上。这时,一般采用微型移液管。 一、微型移液管的制作方法 将外径约0.8mm的细玻璃管的一端拉细,插入金属鞘固定,将玻璃管垂直,具体步骤全部操作都在显微镜下面进行。细胞分离操作 操作前制备好移液管,不必再灭菌.首先,取下起保护作用的金属鞘,装在用于显微操作的支管或L型移液管夹具上.在这种情况下,用树脂固定插入移液管的夹具口,同时密封.在三通口处.将其一口用橡皮管连接,橡皮管的另一端接一个约5m1的注射器,将它做为接收器,把移液管孔向上,橡皮管用接收器台夹固定. 分离技术与子囊解剖相同.也在琼脂板上进行.把琼脂板从培养皿中无菌地取出,放在大型玻璃上(更好为24 X 35mm 或 24X50mm).用接种环沽取细胞悬液点滴在琼脂表面上,置于解剖湿室内放置一会儿,使水分渗入琼脂内.这时如果留有大量的水份,则很难使微型移液管接近目的细胞。似过于干燥也不好.更好是使微型移液管顶端接触细胞时.处于可滑动状态。使移液管慢慢接近于这种状态下的琼脂板上的细胞,这时用左手拿注射器,加压,加大移液管内的气压,压力过高,则会吹起泡来;而压力过低,则由于毛细管现象而吸收大量的细胞.所以.接触到了细胞时,要稍稍降低移液管内压,使细胞滑进移液管中.由于吸进去的细胞仅仅留在移液管的顶端部分.因此,需将移液管顶端下移.离开琼脂表面,然后,移动琼脂板至适当的位置.使移液管上升,与琼脂表面接触,同时提高移液管内压.细咆就由移液管口滑出、跑到琼脂板上.重复操作.在一个琼脂板上可以分离到10-20个单细胞,分离操作终了 ,将琼脂板从玻璃上取下.转移到培养皿中的背养培养基平板上,在适当的温度下防治2-3天,等待菌落长出为止
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