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CCD影像分析-小工件影像测量工具显微镜
所属分类:显微镜百科 点击次数:271 发布日期:2022-06-20
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针对ATP合成酶,本实验选择CyDye作为荧光标记分子,包括Cy3及Cy5,并采用532nm绿光激光作为Cy3的激发光源。将浓度在10~100pM等级的CyDye洋菜溶液,旋镀制成含水达99%的洋菜胶体薄膜以进行系统测试。测试的结果,无论是CCD影像分析,或是APD光子计数量测,均显示本实验所建立的稜镜式全反射显微荧光显微术系统,确实具有进行单分子研究的能力,其中最主要的证据系Cy3单分子单一步骤光淬灭的行为。实验的背景荧光值仅每秒约20个单光子,讯号背景比值平均在13左右,更高达20,且咸信仍有提升空间。在本实验系统的观测下,Cy3荧光单分子在发生光淬灭之前,约可产生100,000~1,000,000个光电子讯号。 单分子实验系统确立后,未来将可以生物马达为主角,进行单分子动态行为分析与动力学研究,包括以Cy3配合Cy3,进行荧光共振能量传递(Fluorescence Resonance Energy Transfer)之实验,以期透过化学观点,探讨生物马达的工作。
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