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大肠杆菌及金黄色葡萄球菌细胞观察用显微镜!
所属分类:显微镜百科 点击次数:391 发布日期:2022-06-20
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高解析度扫描式电子显微镜 (HR-SEM Analysis)将生长至对数期的枯草杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌细胞分别或溷合培养
在 LB 或 S7 agar,37℃、3 hr 后将 EM grids 覆盖上细胞,再培养 3 hr。将 EMgrids 轻轻移开并用 0.1M sodium cacodylate buffer (Na(CH3)2AsO2 3H20; pH 7.2)〃洗 之后再用 2﹪glutaraldehyde (溶于 sodium cacodylate buffer)固定细胞 25℃、
2 hr。接着将细胞培养在 1﹪osmium tetroxide 中,25℃、1 hr 再次固定细胞 (需避光)。接着用逐渐增加浓度的乙醇使标本脱水。最后,将黏附于 EM grids 上的细胞用逐渐增加浓度的 freon113 洗 之后将标本 coating 上 gold-palladium (约8 mm size)后即可使用 FEG HR-SEM 观察。
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