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相邻的枯草杆菌细胞可以互相交换细胞质中的物质
所属分类：显微镜百科 点击次数：301 发布日期：2022-06-20
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结果与讨论
相邻的枯草杆菌细胞可以互相交换细胞质中的物质显微镜首先使用染色体中带有绿色萤光基因 (gfp)的枯草杆菌细胞 SB444，与缺乏 gfp 的 PY79 共同培养在固体培养基上，之后使用萤光显微镜观察。结果发现从 gfp+细胞所在的位置到 gfp-细胞，绿色萤光呈现梯度下降，涵盖的范围约
有 40 M (图 1Ab,1B)；当将绿色萤光与 phase contrast 影像重迭后，发现绿色萤光梯度只存在于有细胞的位置 (图 1Ac)。接着显微镜使用 time-lapsemicroscopy 观察单一细胞层次，在 T0 分钟时只有 gfp+细胞所在位置有侦测到绿色萤光 (图 1Ca)；30 分钟过后，gfp+细胞附近的 gfp-细胞也开始出现微弱的萤光讯号 (图 1Cb)；并且，萤光强度与距离 gfp+细胞的远近呈现函数关係 (图
1D)。接着，显微镜使用 Calcein 进行测试。Calcein 为十分亲油性物质，能够轻易穿越细胞膜 但一旦进入细胞后就会被细胞质中的 esterases 水解成亲水性物；质，而被侷限在细胞质中。显微镜首先将 PY79 与 calcein-AM 一同培养，之后再与未标定的细胞溷合。于 t0 分钟时只有被标定的细胞可侦测到萤光强度 (图2A,2A’)；但随着时间增长，原先未被标定的细胞也开始出现萤光讯号 (图2B,2C)；而在 t30 分钟时几乎所有未被标定的细胞都可侦测到萤光讯号，但一开始被标定的细胞其萤光讯号有减弱的现象 (图 2C,2C’)。
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