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血球分离！利用离心法分离出成分进一步观察血球细胞
所属分类：显微镜百科 点击次数：229 发布日期：2022-06-20
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血液中血球之分离目的 「分类」为人类认识大自然生物最基本的法则，想要瞭解人体生命运作的奥秘，必须先对细胞做型态及功能上的做分类，这些看似简单的想法，却是往后探究生命活动的基础。此实验是以血液这个「溷合物」为例子，利用离心的方法分离出各种成分并进一步观察血球细胞。原理 血液像河流一样，主要是水分，就是血液中液体的部分，称之为血浆(Plasma)。在这流动的液体中也有一些浮游生物，就是红血球(Red blood Cells)、白血球 (White blood cells)、和血小板(Platelets)等，它们大小不一，形状不同，数量也不同。体积以白血球更大、红血球次之、血小板最小；数量以红血球最多；白血球有核行动有自主性。由于血液细胞依不同种类都有其特定的密度，如：红血球还有大量的血红素，而血红素中又含有铁，因此在血球细胞中其密度更大，因此利用不同溶液的密度，使细胞在离心的过程中，会分佈在与其密度相同的溶液介面。粒子在离心时，其 分子量、分子密度、组成、形状 等，均会影响其沉降速率，沉降係数即用来描述此沉降性质；其单位为 S (Svedberg unit)，每一种粒子的沉降係数与其分子密度或分子量成正比。 不同沉降係数的粒子可利用离心法在密度梯度中作分离。材料 血液(5ml)：前预先抽出，以heparin防止凝血，为各种血球细胞的来源。设备 悬臂式离心机 (直径10cm)离心管 玻片药品 Ficoll-Paque溶液食盐水:低张，等张(约0.4%)，及高张溶液步骤 1. 10ml离心管内加入5mlFicoll-Paque溶液，再缓慢的将5ml血液加入离心管。(注意！两者不能溷合。)2. 在18℃下，以3000rpm的离心速度，离心30分钟。3. 离心后，离心管内会分成不同的溶液层。记下所见到的分层4. 将各层作成玻片标本观察，看各种血球的型态。5. 吸取红血球那一层溶液，分别以低张，等张及高张溶液稀释十倍后滴一滴在载玻片上，盖上盖玻片，以400X观察红血球的型态，讨论渗透压对于细胞的影响。时间 约一个半小时备注
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