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表面的粗糙度,黏附性等物理特征分析图像显微镜
所属分类:显微镜百科 点击次数:131 发布日期:2022-06-20
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表面的粗糙度,黏附性等物理特征分析图像显微镜基本操作 细菌是海洋中微型生物的主要组成者之一。以下操作介绍以细菌样品为例,工作模式以液体环境下的轻敲模式为例。 样品准备 对于纯培养的菌株,指数后期取样时菌液的浓度大约是是108 cells/mI。,取1毫升菌液.用蒸馏水悬浮.以2000~3000 rpm的转速离心洗去碎屑和盐分,未经充分洗净的胞外多糖对成像也有较大的影响。 细菌在液体池中容易漂浮,难以和基底牢固结合。因此目前固定通过电荷吸附的方 显微镜观察 样品制备好之后,将固定有样品的铁片置于AFM的载物台上,可以选用100/微米-100微米扫描管,用接触模式的Si3N4探针进行成像,将探针和液体池装好,逐步将探针逼近表面,当针尖和样品比较接近时,调节激光光斑的位置,使光斑位于四相光电检测器中心。之后切换到轻敲模式,调好针尖的震动频率,选择下针。整个成像过程中尽量保持室温恒定,避免来自外界的震动源干扰。起始的扫描范围是10肚m,频率1 Hz。首先在大范围10μm进行大范围扫描以便选取合适的区域,然后通过软件操控,缩小扫描范围,同时调节扫描频率,比例增益,积分增益,电压值等各项参数以获得清晰的成像,观察细菌表面的细微结构。 在用轻敲模式扫描过程中,在时间因素影响不大的情况下,尽量小的扫描速率可以减少针尖对样品的伤害,使针尖在反馈系统的控制下更好的扫描样品表面,获得更真实的采样点信息。在扫描的过程中,图像从四个不同的扫描角度分别扫描多次,以避免扫描过程中的假象,每个区域都通过扫描获得三至四幅高质量的图像,并从中选取具有代表性的一张。 图像分析 扫描获得的图像可以进行三维变换处理,获得更直观的三维形貌,并通过后台软件对样品表面的粗糙度,黏附性等物理性质进行分析 原子力显微镜技术的特点与优势 在海洋中不同的温、盐、压力、酸碱条件和光强等环境因子的相互作用促成了海洋超微型生物的形态和表面结构的多样性。在对复杂多变的自然环境的适应过程中,超微型生物形态的多样性反应了其对环境的特殊响应和潜在生理变化过程,具有重要的研究意义。然而,在对超微型生物的研究发展过程,如何尽量真实的反映研究对象的生活状态,更大限度的减小人为因素的干扰是科研人员一直追求的目标。
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