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逆转录RNA大与50ng/ul会怎么样？
所属分类：显微镜百科 点击次数：252 发布日期：2022-07-02
大家好，这里是老上光显微镜知识课堂，在这里你可以学到所有关于显微镜知识，好的，请看下面文章：逆转录的时候体系要求RNA的Zui大量是 50ng/ul ，大于这个数会有什么样的后果？？？
在做逆转录的时候体系要求RNA的Zui大量是 50ng/ul ，但是加入的量却远远大于这个数。我想知道，如果是大于这个量是不是体系就不能逆转了？还是超过这个Zui大限量，它也只是按50ng/ul进行逆转录？？？？？
超过这个量，首先是反转录酶的能力有限，不能全部RNA都反转录，如果用来做定量，结果会不准确（不能保证你需要的特定RNA全部被反转录了）。其次，如果加入的体积过大，提取RNA时残留的一些试剂可能会影响酶活力。
不知道你的cDNA打算拿来做什么，如果是做PCR，那实在没必要加过量的RNA啊。
不晓得你要来干什么。我一般为了省试剂都把这个体系减半了。
我是用来做实时荧光定量PCR（QRT-PCR）的。还有想请教高手，我的PCR结果与Western Bolting结果相反。您遇到过这样的问题吗？谢谢！
不晓得你要来干什么。我一般为了省试剂都把这个体系减半了。
稀释的时候算错了。使得加入的剂量远远大于实际剂量。我之前也是用给定的体系逆转录。得到的cDNA我一般会稀释10倍之后再用。想请问一下，我稀释10倍之后会引起结果逆转吗！？？
我没遇到这个问题，因为我没做过
不过培训qPCR时，公司的人有说过，有时候会有这种情况，不过具体的我记不得了，不好意思啦。
逆转录过程
相关阅读：想做反转录，然后扩增目的条带，不知道RNA提得可以吗？
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